Retatrutidové nečistoty

Retatrutidové nečistoty|Ritaglutid Nečistota Referenčné|Vlastná syntéza nečistôt a overenie štruktúry|Vedecký-peptid

Kontroly nečistôt ritaglutídu - pre vývoj analytických metód, štúdie kvality, veda o predkladaní generických liekov-Peptid poskytuje vlastnú syntézu nečistôt súvisiacich s ritalutidom, vrátane chýbajúcich peptidov, oxidovaných nečistôt, spadu mastných kyselín, dimérov atď., s údajmi o štruktúrnom potvrdení na podporu štúdií profilovania nečistôt. Vitajte a kontaktujte nás. Vitajte a kontaktujte nás.

Retatrutid Impurities (Retatrutide) bol v posledných dvoch rokoch v plameňoch, GLP-1/GIP/glukagón triagonista, a jeho účinok na zníženie hmotnosti je ešte silnejší ako účinok Simeoglutidu. Domáce peptidové generické firmy na to čumia, patent sa blíži ku koncu, kto prvé chytí prvé generikum, ktoré bude môcť zjesť veľký kus trhu.

 

Na výrobu generických liekov je však tvrdým jadrom kvalitný výskum. Analýza spektra nečistôt, produkty na kontrolu nečistôt, validácia metód, z ktorých žiadna nemôže chýbať v informáciách o podaní. Retarotid je veľký peptid s 39 aminokyselinami a dvoma bočnými reťazcami mastných kyselín. Proces syntézy môže produkovať viac nečistôt ako bežné peptidy - chýbajúce peptidy, oxidované nečistoty, diméry, produkty vylučovania mastných kyselín, pričom každý z nich musí byť objasnený.

 

My v Science-Peptide sme nazbierali veľa skúseností so syntézou komplexných peptidových nečistôt. Máme súbor procesov prípravy nečistôt špeciálne pre modifikované peptidy s dlhým reťazcom, ako je ritaglutid. Môžeme prispôsobiť syntézu rôznych kontrol nečistôt ritaglutidu podľa vašich potrieb so štrukturálnymi potvrdzovacími údajmi a pomôcť vám stanoviť metódu, aby ste mali pri podávaní jasnú predstavu.

Ritaglutid je veľká molekula, proces syntézy je zložitý a zdroj nečistôt je tiež zložitý. Keď robíme štúdie nečistôt, zameriavame sa hlavne na tieto kategórie:

Chýbajúci peptid
Pod-naviazanie jednej alebo niekoľkých aminokyselín počas syntézy je najbežnejšou procesnou nečistotou. Rôzne polohy chýbajúceho peptidu majú rôznu polaritu a je potrebné ich lokalizovať pomocou HPLC. Napríklad, ak chýba lyzín na pozícii 15, alebo ak chýba aminokyselina na konci reťazca mastnej kyseliny, retenčný čas je úplne iný, ale bez kontroly neviete, kto je vrchol.

Oxidujúce nečistoty
Met sa ľahko oxiduje na sulfoxid, ktorý mení svoju polaritu a ovplyvňuje test čistoty. Keďže Met je prítomný v sekvencii Retarotidu, oxidovaná nečistota je základnou kontrolnou položkou. Niekedy sa zoxidované vrcholy objavia po určitom čase, takže to musíme sledovať.

Diméry/polyméry
Počas syntézy alebo skladovania sa dve alebo viac molekúl spoja disulfidovými väzbami alebo ne{0}}kovalentnými interakciami a sú kľúčovými nečistotami v látke. Zdvojnásobenie molekulovej hmotnosti diméru je často veľkým vrcholom pri HPLC a musí byť kontrolované.

Produkty na odbúravanie mastných kyselín
Retarotid nesie dva bočné reťazce mastných kyselín (napr. kyselinu oktadekándiovú) a táto modifikácia môže byť čiastočne odstránená počas syntézy alebo skladovania, čo vedie k -odstráneniu nečistôt z mastných kyselín. Štruktúra tohto typu nečistoty je taká odlišná od hlavného píku, že si vyžaduje špecializovanú kontrolu na jej lokalizáciu. Stretli sme sa so zákazníkom, ktorý robil štúdie stability, po mesiaci skladovania sa objavil vrchol a potom sme zistili, že mastná kyselina klesla o polovicu vrcholu.

Deamidované nečistoty
Asparagín (Asn) a glutamín (Gln) sa ľahko deamidujú v kyslých alebo zahrievaných podmienkach za vzniku izomérov. Tieto nečistoty sa často nachádzajú v testoch nútenej degradácie a mali by sa kontrolovať.

Diastereoizoméry
Počas syntézy s dlhým-reťazcom môžu jednotlivé aminokyseliny prejsť racemizáciou, čo vedie k diastereoizomérom, ktoré je potrebné detegovať chirálnou chromatografiou alebo špeciálnymi metódami. Hoci obsah väčšinou nie je vysoký, odborníci sa naň budú pýtať pri jeho vyhlásení.

Mnohé z týchto nečistôt nie sú dostupné na trhu a je potrebné ich syntetizovať na mieru. Urobili sme veľa projektov na prispôsobenie nečistôt ritaglutidu a pokryli sme vyššie uvedené kategórie.

Delécia peptidovej série
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 15 is missing, or the amino acid at the end of the fatty acid chain is missing. We can synthesize them according to your impurity profile, and the purity is usually >95 % s MS. Zákazník nás požiadal, aby sme syntetizovali sadu 12 chýbajúcich peptidov od N-terminálu po C-terminál a my sme ich vyrobili všetky.

Oxidujúce nečistoty
Met in Retarotide is oxidized to sulfoxide, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the control product in oxidized state. The purity of the product is >95% a môžeme poskytnúť spektrum MS na potvrdenie stupňa oxidácie. Oxidácia je postupný proces a dominanciu sulfoxidu môžeme dosiahnuť s niekoľkými vedľajšími-produktmi.

Dimer
Diméry vytvorené krížovým{0}}prepojením alebo ne{1}}kovalentnou interakciou možno pripraviť rôznymi metódami a izolovať a purifikovať, aby poskytli kontroly vysokej čistoty. Molekulová hmotnosť diméru je dvojnásobná oproti hlavnému vrcholu, ktorý je známy MS. Niektorí zákazníci požiadali o dimér na overenie metódy a my sme im poskytli 98% čistotu.

Produkty na odbúravanie mastných kyselín
Toto je nečistota špecifická pre Retarutin. Reťazce mastných kyselín môžu byť čiastočne prerušené alebo úplne oddelené, čo má za následok celý rad súvisiacich nečistôt. Môžeme syntetizovať rôzne varianty s chýbajúcimi alebo skrátenými mastnými kyselinami, ktoré vám pomôžu presne určiť umiestnenie týchto nečistôt. Najkomplikovanejší prípad, aký sme kedy robili, bol, keď nás zákazník požiadal, aby sme syntetizovali variant reťazca mastnej kyseliny s chýbajúcimi šiestimi uhlíkmi a my sme to urobili.

Deamidované nečistoty
Pre miesta Asn a Gln v sekvencii môžeme pripraviť dezaminované kontroly nečistôt nútenou degradáciou alebo cielenou syntézou. Rozdiel v molekulovej hmotnosti po deamidácii je len 1, preto ich nie je ľahké rozlíšiť pomocou MS a je potrebné použiť špeciálne chromatografické podmienky, ktoré vieme zosúladiť.

Iné prispôsobené nečistoty
Ak vo svojom výskume nájdete novú neznámu nečistotu, môžeme vám pomôcť analyzovať štruktúru a syntetizovať ju. Pošlite nám vzorku, my urobíme LC-MS analýzu, prešpekulujeme štruktúru, potom smerovú syntézu a potom porovnáme retenčný čas a hmotnostné spektrum, aby sme potvrdili zhodu. Tento proces sme robili mnohokrát a úspešnosť je pomerne vysoká.

Vývoj a validácia analytických metód
Pri nastavovaní metódy HPLC alebo LC{0}}MS je potrebná kontrola nečistôt na lokalizáciu, separáciu, lineárny rozsah a validáciu výťažnosti. Bez kontroly chýba validácia metódy. Mnoho zákazníkov nás žiada, aby sme najprv urobili niekoľko kľúčových nečistôt na nastavenie metódy a potom pomaly doplnili zvyšok.

Heterogénna hmotnostná spektrometria
Keď sa deklaruje generický liek, vyžaduje sa komplexná kvalitatívna a kvantitatívna analýza procesných nečistôt a produktov degradácie. Lokalizáciu, obsah a štruktúru každej nečistoty je potrebné potvrdiť kontrolným produktom. Videli sme, že vyhlásenie o informáciách bolo zaslané na doplnenie, deväťkrát z desiatich sú nečistoty tohto kusu nerozumeli.

Štúdie stability
Pri dlhodobej{0}}stabilite a zrýchlených testoch je potrebné určiť, ktoré produkty degradácie sú dominantné a aký je trend v obsahu. Pomocou kontroly nečistôt je možné presne kvantifikovať a monitorovať. Keď zákazník robil stabilitu prípravku Ritaglutide, zistilo sa, že vrchol degradácie rastie veľmi rýchlo za zrýchlených podmienok, takže sme ho analyzovali pomocou MS a syntetizovali, aby sme potvrdili štruktúru, a potom sa zákazníkovi uľavilo, že nám to oznámil.

Testovanie dávkového uvoľnenia
Po komercializácii musí byť každá šarža API alebo formulácie testovaná na danú látku. Kontrola nečistôt je základným nástrojom na testovanie uvoľňovania. Bez toho nemôžete povedať, kto je vrchol a koľko to je.

Informácie o deklaráciách generických liekov
Štúdie nečistôt sú kľúčovou časťou informácií o podaní. Poskytnutie kompletnej analýzy profilu nečistôt a kontrolných údajov môže výrazne znížiť riziko vyhodnotenia problému kompenzácie. Odborník, ktorý deklaruje informácie, máte k dispozícii kompletnú sadu produktov na kontrolu nečistôt, kompletné údaje a oveľa viac.

Prípad 1: farmaceutická spoločnosť, program generických liekov ritaglutidu
Vyvíjajú generickú verziu ritaglutu a potrebovali kompletnú sadu kontrol nečistôt na validáciu metódy. Prispôsobili sme im 8 nečistôt: 3 chýbajúce peptidy, 2 oxidované nečistoty, 1 dimér, 2 exfoliované produkty mastných kyselín. Čistota každého z nich bola vyššia ako 95 %, s údajmi MS. Vedúci projektu povedal: "Tieto nečistoty nemôžeme kúpiť a hľadali sme niekoľko spoločností, ktoré to nedokážu. Ale dokázali ste ich vyrobiť všetky a údaje boli kompletné, čo bola veľká pomoc." Neskôr bola úspešne ukončená validácia ich metódy a boli doplnené aj informácie o deklarácii.

Prípad 2: CRO spoločnosť, profilovanie nečistôt
Uskutočnili kvalitný výskumný projekt o retalutide, ktorý si vyžadoval komplexnú analýzu procesných nečistôt. Poslali nám vzorky surového peptidu a my sme vykonali analýzu LC-MS, odvodili možné štruktúry niekoľkých neznámych nečistôt, potom sme ich cielene syntetizovali a potom porovnali retenčné časy a hmotnostné spektrá, aby sme potvrdili tri nové nečistoty. Klient použil tieto údaje na zlepšenie spektra nečistôt a prešiel akceptáciou klienta. Neskôr nás požiadali, aby sme urobili nečistoty iných druhov.

Prípad 3: Štúdie stability, biotechnologická spoločnosť
Skúmali stabilitu ritaglutidu a zistili, že množstvo degradačného produktu sa v zrýchlených podmienkach rýchlo zvyšuje, ale nevedeli, čo to je. Vzorku sme analyzovali pomocou LC-MS a predpokladali sme, že ide o deamidačnú nečistotu na určitom mieste Asn, a potom sme ju cielene syntetizovali a potvrdili porovnaním. Zaviedli test s použitím tejto kontroly a presne monitorovali trend degradačného produktu. Keď bola predložená záverečná správa, údaje boli veľmi spoľahlivé.

Retalutide je populárny produkt, ale štúdie nečistôt sú chúlostivou úlohou. Chýbajúce peptidy, oxidované nečistoty a produkty exfoliácie mastných kyselín vyžadujú špecializované kontroly na lokalizáciu a kvantifikáciu. Ak robíte kvalitný výskum alebo všeobecný vývoj ritaglutu a potrebujete kontrolu nečistôt, neváhajte sa s nami porozprávať. Urobili sme veľa práce, vieme, ktoré nečistoty sú ťažké a vieme, ako sa z toho dostať.