Semaglutidové nečistoty

Semaglutidové nečistoty|Kontrola nečistôt simeglutidu|Vlastná syntéza nečistôt a potvrdenie štruktúry|Vedecký-peptid

Kontrola nečistôt Soma Lutide (Simeglutide) - pre GLP-1 štúdia kvality lieku, predloženie generického lieku.Science-Peptid poskytuje vlastnú syntézu nečistôt súvisiacich so Soma Lutide, vrátane chýbajúcich peptidov, oxidovaných nečistôt, produktov na odlupovanie mastných kyselín, PEG-reťazca, spolu s štrukturálnymi nečistotami atď. Môžeme podporiť váš výskum profilu nečistôt. Vitajte a kontaktujte nás.

Semaglutid (tiež známy ako Semaglutid) je v týchto rokoch v plameňoch. Novo Nordisk sa spolieha na to, že tlačí trhovú hodnotu na svetovú druhú, domácich výrobcov peptidových generík, takmer sa na to nepozerá. Orálna lieková forma a injekčná lieková forma sú veľké trhy. Kto môže po vypršaní patentu ako prvý urobiť kvalitný výskum, kto bude mať možnosť uchmatnúť si prvé generikum.

 

Štúdia kvality somatostatínu je však, úprimne povedané, náročnejšia ako pri mnohých peptidoch. Je to 31-peptid s reťazcom mastnej kyseliny (oktadekándiová kyselina) a PEG linkerom. Táto štruktúra určuje, že jeho spektrum nečistôt je obzvlášť bohaté - chýbajúce peptidy, oxidované nečistoty, produkty uvoľňovania mastných kyselín, nečistoty súvisiace s reťazcom PEG, diméry, každý musí mať kontrolu, každý musí byť číry. Najmä reťazec PEG, ktorý sa nenachádza v bežných peptidoch, je jedinečný pre somalutid.

 

Nazbierali sme veľa skúseností v syntéze komplexných peptidových nečistôt. Špecializujeme sa na štúdium somatostatínu a vieme, aké sú ťažkosti v jeho profile nečistôt a aké sú základné kontrolné položky. Môžeme prispôsobiť syntézu rôznych kontrol Semaglutide Impurities podľa vašich potrieb so štrukturálnymi potvrdzovacími údajmi a pomôcť vám stanoviť metódu, takže je menej pravdepodobné, že vám bude pri podávaní vydaný dodatok.

Molekulárna štruktúra somatostatínu určuje, že jeho profil nečistôt je oveľa zložitejší ako profil bežných peptidov. Keď robíme štúdie nečistôt, zameriavame sa hlavne na tieto kategórie:

Chýbajúci peptid
31 aminokyselín, z ktorých ktorákoľvek chýba počas procesu syntézy, je nečistota. Retenčné časy chýbajúcich peptidov na HPLC boli široko distribuované, s rôznou polaritou chýbajúcich peptidov v rôznych polohách. Niektoré chýbajú na N-konci, niektoré v strede a niektoré blízko miesta pripojenia mastnej kyseliny. Dostali sme objednávku od zákazníka, ktorý požiadal o asi tucet chýbajúcich peptidov na rôznych pozíciách, aby sa našli všetky možné chýbajúce nečistoty v ich procese.

Oxidujúce nečistoty
Somalutid má vo svojej sekvencii metionín (Met), ktorý je náchylný na oxidáciu na sulfoxid a potom na sulfón. Oxidované nečistoty sa často objavujú v štúdiách stability a po určitom čase rastú. Urobili sme porovnanie, za zrýchlených podmienok po dobu jedného mesiaca môže vrchol oxidácie narásť na viac ako 0,3% bez kontroly.

Produkty na odbúravanie mastných kyselín
Vedľajší reťazec mastnej kyseliny (oktadekándiová kyselina) somatostatínu je pripojený k lyzínu cez linker a táto modifikácia sa môže čiastočne uvoľniť počas syntézy alebo skladovania. Problematickejšie je, že k odlupovaniu môže dochádzať na rôznych miestach - medzi mastnou kyselinou a linkerom a medzi linkerom a peptidom -, čo vedie k rôznym nečistotám. Pre našich zákazníkov sme syntetizovali niekoľko nečistôt súvisiacich s mastnými kyselinami-, od úplného vylučovania až po malú časť.

nečistoty súvisiace s PEG-reťazcom
Toto je najšpecifickejší typ nečistoty v somatostatíne. Má PEG (polyetylénglykol) linker a reťazec PEG sa môže počas syntézy zlomiť, skrátiť alebo polymerizovať, čo vedie k sérii súvisiacich nečistôt. Tieto nečistoty sa nenachádzajú v bežných peptidoch, ale sú jedinečné pre somatostatín a je ťažké ich študovať v štúdiách kvality. Urobili sme rôzne varianty delécie reťazca PEG, skrátenia reťazca PEG a oxidácie reťazca PEG.

Diméry/polyméry
Dve alebo viac molekúl somatostatínu sa zhlukujú a tvoria dimér alebo vyšší. Molekulová hmotnosť diméru je dvojnásobná oproti hlavnému píku a pri HPLC je to často široký pík, takže musí byť špeciálne oddelený a čistený predtým, ako sa môže použiť ako kontrola. Pripravili sme diméry a na dosiahnutie čistoty viac ako 95 % bolo potrebných niekoľko kôl čistenia.

Deamidované nečistoty
Asparagín (Asn) a glutamín (Gln) sa ľahko deamidujú v kyslých alebo zahrievacích podmienkach, výsledkom čoho sú izoméry. V sekvencii somatostatínu je niekoľko Asn a Gln a deamidačná nečistota sa často objavuje v teste nútenej degradácie, takže na lokalizáciu nečistoty sa musí použiť kontrolný produkt.

Diastereoizoméry
Počas syntézy s dlhým reťazcom môžu jednotlivé aminokyseliny prejsť racemizáciou, čo vedie k diastereoizomérom. Obsah tohto druhu nečistôt zvyčajne nie je vysoký, ale odborníci sa budú pýtať pri deklarovaní a je lepšie mať kontrolný produkt na potvrdenie.

Mnohé z týchto nečistôt sa nedajú kúpiť a je potrebné ich syntetizovať na mieru. Uskutočnili sme už veľa projektov na prispôsobenie somatostatínových nečistôt, ktoré pokrývajú všetky vyššie uvedené kategórie.

Delécia peptidovej série
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95 %, s potvrdením MS a NMR. Syntetizovali sme sadu peptidov s 5 aminokyselinovými rozstupmi od N-konca po C-terminál.

Oxidujúce nečistoty
Met in Somatostatin is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. The purity of the product is >95 % a môžeme poskytnúť spektrum LC-MS na potvrdenie stupňa oxidácie. Sulfoxid a sulfón sa oddelia pomocou HPLC a môžeme urobiť oboje.

Produkty na odbúravanie mastných kyselín
Toto je hlavné zameranie nečistôt somalutidu. Reťazec mastnej kyseliny môže byť úplne alebo čiastočne uvoľnený. Môžeme syntetizovať sériu variantov pre rôzne polohy zhadzovania. V jednom z najkomplikovanejších projektov, aké sme kedy robili, nás zákazník požiadal, aby sme syntetizovali nečistotu so 6 uhlíkmi chýbajúcimi v reťazci mastných kyselín a trvalo nám dva mesiace, kým sme to spravili.

nečistoty súvisiace s PEG-reťazcom
Toto je jedna z najťažších nečistôt somatostatínu a je to aj naša sila. PEG reťazec môže chýbať, môže byť skrátený, zlomený, oxidovaný a môžu sa vytvárať rôzne varianty. Urobili sme nečistotu s úplne chýbajúcim reťazcom PEG (tj de-PEGylovaný somatostatín), variant s dĺžkou reťazca PEG na polovicu a produkt s reťazcom PEG oxidovaný. Zákazníkovi boli poskytnuté tieto kontroly a spektrum nečistôt súvisiacich s PEG-bolo úplne stanovené.

Dimer
Diméry vytvorené krížovým{0}}prepojením alebo ne{1}}kovalentnými interakciami možno pripraviť rôznymi metódami a izolovať a purifikovať, aby poskytli kontroly vysokej čistoty. Čistenie dimérov je náročné, ale máme skúsenosti, aby sme vedeli, ako monoméry oddeliť.

Deamidované nečistoty
Pre miesta Asn a Gln v sekvencii môžeme pripraviť dezaminované kontroly nečistôt nútenou degradáciou alebo cielenou syntézou. Rozdiel v molekulovej hmotnosti po deamidácii je len 1, čo nie je ľahké rozlíšiť pomocou MS, preto na potvrdenie zvyčajne používame NMR alebo špeciálne chromatografické podmienky.

Dther prispôsobené nečistoty
Ak vo svojom výskume nájdete novú neznámu nečistotu, môžeme vám pomôcť analyzovať štruktúru a syntetizovať ju. Pošlite nám vzorku, my urobíme LC-MS analýzu, prešpekulujeme štruktúru, potom smerovú syntézu a potom porovnáme retenčný čas a hmotnostné spektrum, aby sme potvrdili zhodu. Tento proces sme robili mnohokrát a úspešnosť je pomerne vysoká.

Vývoj a validácia analytických metód
Pri nastavovaní metódy HPLC alebo LC{0}}MS je potrebná kontrola nečistôt na lokalizáciu, stanovenie separácie, overenie lineárneho rozsahu a výťažnosť. Bez kontroly chýba validácia metódy. Mnoho zákazníkov nás žiada, aby sme najprv urobili niekoľko kľúčových nečistôt na nastavenie metódy a potom pomaly doplnili zvyšok.

Heterogénna hmotnostná spektrometria
Keď sa deklaruje generický liek, vyžaduje sa komplexná kvalitatívna a kvantitatívna analýza procesných nečistôt a produktov degradácie. Lokalizáciu, obsah a štruktúru každej nečistoty je potrebné potvrdiť kontrolným produktom. Videli sme, že vyhlásenie o informáciách bolo zaslané na doplnenie, deväťkrát z desiatich sú nečistoty tohto kusu nerozumeli.

Štúdie stability
Pri dlhodobej{0}}stabilite a zrýchlených testoch je potrebné určiť, ktoré produkty degradácie sú dominantné a aký je trend v obsahu. Pomocou kontroly nečistôt je možné presne kvantifikovať a monitorovať. Zákazník robil stabilitu prípravku somatostatínu a zistil, že vrchol degradácie rýchlo rástol za zrýchlených podmienok, takže sme ho analyzovali pomocou MS a syntetizovali, aby sme potvrdili štruktúru, a potom sa zákazníkovi uľavilo, keď to oznámil.

Testovanie dávkového uvoľnenia
Po komercializácii musí byť každá šarža API alebo formulácie testovaná na danú látku. Kontroly nečistôt sú základnými nástrojmi na testovanie uvoľňovania.

Informácie o deklaráciách generických liekov
Štúdie nečistôt sú kľúčovou časťou informácií o podaní. Poskytnutie úplných údajov o profilovaní nečistôt a kontrolných údajoch výrazne znižuje riziko prepustenia na preskúmanie.

Prípad 1: Farmaceutická spoločnosť, program generických liekov Somalutide
Vyvíjajú generickú verziu somatostatínu a potrebujú kompletnú sadu kontrol nečistôt na validáciu metódy. Prispôsobili sme im 15 nečistôt: 6 chýbajúcich peptidov, 2 oxidované nečistoty, 1 dimér, 2 produkty exfoliácie mastných kyselín, 3 nečistoty súvisiace s reťazcom PEG a 1 deamidačná nečistota. Čistota každého z nich bola vyššia ako 95 %, s údajmi MS a NMR. Projektový manažér povedal: "Nečistoty somalutidu sú komplikovanejšie ako iné peptidy, najmä ten PEG, ktorý sme hľadali pre množstvo spoločností, ale všetky povedali, že to nedokážu. Ale vy ste to všetko dokázali a údaje boli úplné, čo bola veľká pomoc." Následne bola úspešne ukončená validácia ich metódy a teraz sa pripravujú na podanie.

Prípad 2: CRO, špeciálna štúdia o nečistotách v reťazci PEG
Uskutočnili kvalitný výskumný projekt somatostatínu, ktorý si vyžadoval komplexnú analýzu nečistôt spojených s reťazcom PEG. Systematicky sme syntetizovali nečistoty súvisiace s PEG-: úplná absencia reťazca PEG, zníženie dĺžky reťazca PEG na polovicu, oxidácia koncov reťazca PEG a rozdelenie reťazca PEG na dve časti. syntetizovalo celkovo 8 nečistôt súvisiacich s PEG-. Klient použil tieto kontroly na vytvorenie kompletnej sady metód detekcie nečistôt PEG, ktorá sa stala vrcholom informácií o ich podávaní.

Prípad 3: Štúdie stability, biotechnologická spoločnosť
Robili štúdiu stability somatostatínovej formulácie a zistili, že obsah degradačného produktu sa rýchlo zvyšuje za zrýchlených podmienok, ale nevedeli, čo to je. Vzorku sme analyzovali pomocou LC-MS, predpokladali sme, že ide o mastnú kyselinu vylučujúcu nečistotu na určitom mieste, a potom sme ju cielene syntetizovali a potvrdili porovnaním. Zaviedli test s použitím tejto kontroly a presne monitorovali trend tohto degradačného produktu. Neskôr, pri predkladaní posudku, túto časť údajov odborníci zdôraznili a kvôli solídnym údajom nebola vydaná žiadna náhrada.

Somatostatín je super populárny produkt, ale štúdium nečistôt je chúlostivá práca, najmä nečistoty súvisiace s reťazcom PEG a produkty na exfoliáciu mastných kyselín, s ktorými si mnohí výrobcovia nevedia poradiť. Ak robíte kvalitný výskum alebo generický vývoj somatostatínu a potrebujete kontrolu nečistôt, vitajte a porozprávajte sa s nami. Urobili sme veľa práce, vieme, aké sú ťažkosti a vieme, ako sa z toho dostať.